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Tissu sanguin

Tissu sanguin<o:p></o:p>

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I) Introduction<o:p></o:p>

- Cellules du sang : cellules libres qui dérivent de la CSM  et se mettent en activité surtout à la naissance pour protéger l’organisme des agressions du monde extérieur.<o:p></o:p>

- Sang = tissu mésenchymateux, dont la MEC est liquide → plasma.<o:p></o:p>

- Le sang est un liquide qui circule dans le système vasculaire (clos), constitué de 2 parties : plasma (=MEC) + éléments figurés (qui circulent dans le plasma).<o:p></o:p>

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v  Plasma = phase totale liquidienne du sang = 54% du volume sanguin.<o:p></o:p>

v  Hématocrite = volume occupé par les GR = 44% du volume sanguin.<o:p></o:p>

v  GB + plaquettes = 2% du volume sanguin<o:p></o:p>

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II) Le plasma (54% du volume sanguin)<o:p></o:p>

- Solution aqueuse de substances organiques et inorganiques produits de synthèse/dégradation/communication.<o:p></o:p>

- Essentiellement constitué de protéines : transport (albumine), défense (anticorps), enzymes...<o:p></o:p>

- Sérum : fraction liquidienne qui se sépare du caillot = plasma dépourvu de fibrines et de facteurs de coagulation.<o:p></o:p>

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III) Eléments figurés du sang<o:p></o:p>

- 3 grandes familles de cellules sanguines :<o:p></o:p>

Ø  GR = Hématies = Erythrocytes<o:p></o:p>

Ø  Plaquettes<o:p></o:p>

Ø  GB = Leucocytes 50-70% de PN + 25-40% de Lymphocytes + 2-10% de Monocytes<o:p></o:p>

                       → Granulocytes = Polynucléaires : neutrophiles (PNN) + basophiles (PNB) + éosinophiles(PNE)<o:p></o:p>

                                   → Agranulocytes : lymphocytes (B, T et NK) + monocytes.<o:p></o:p>

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- Différentes destinées selon le type de cellules :<o:p></o:p>

Ø  GR + Plaquettes → restent dans le compartiment sanguin et n’en sortent qu’en cas d’hémorragie.<o:p></o:p>

Ø  GB → capacité de quitter le compartiment sanguin pour surveiller le reste de l’organisme.<o:p></o:p>

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- Les leucocytes sont dans le sang de manière transitoire, soit à l’état de repos (= Agranulocytes ), soit à l’état de tissu traumatisé (= Granulocytes) → pas de polynucléaires (PN) dans les tissus à l’état de repos !<o:p></o:p>

- Les PNN se divisent en 2 groupes : pool marginal (attente d’un signal) + pool circulant (patrouille de surveillance).<o:p></o:p>

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- Hématocrite : volume occupée par les GR 40%<o:p></o:p>

- Hémogramme : étude quantitative et qualitative des éléments figurés du sang (nb d’hématies, t* d’hémoglobine...)<o:p></o:p>

- Variabilité inter-individuelle (constante de base ≠ entre plusieurs individus).<o:p></o:p>

- Système de régulation précis (constante de base presque identique au cours du temps).<o:p></o:p>

- Formule leucocytaire : à l’état physiologique → 60% pour les granulocytes et 40% pour les agranulocytes<o:p></o:p>

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Pathologie<o:p></o:p>

Trop<o:p></o:p>

Pas assez<o:p></o:p>

Taux d’hémoglobine<o:p></o:p>

Polyglobulie<o:p></o:p>

Anémie<o:p></o:p>

Plaquettes<o:p></o:p>

Thrombocytose<o:p></o:p>

Thrombopénie<o:p></o:p>

Leucocytes<o:p></o:p>

Hyperleucocytose<o:p></o:p>

Leucopénie<o:p></o:p>

Anémie : on peut avoir peu d’hémoglobine MAIS beaucoup de GR.<o:p></o:p>

Polyglobulie : taux d’hémoglobine élevé implique souvent une augmentation de GR.<o:p></o:p>

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- Valeur absolue (= Nb de GB * pourcentages de PN, Lymphocytes et Monocytes) est importante car on peut avoir des pourcentages normaux mais une valeur absolue anormale.<o:p></o:p>

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IV) Méthodes utilisées pour l’étude du sang et de la moelle osseuse<o:p></o:p>

- Au niveau du sang : frottis sanguin coloré au MGG.<o:p></o:p>

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- Au niveau de la moelle osseuse : on veut analyser les progéniteurs, 2 techniques :<o:p></o:p>

Ø  Ponction de moelle osseuse → frottis de moelle osseuse (= myélogramme) coloré au MGG.<o:p></o:p>

Ø  Biopsie ostéo-médullaire (lorsque la ponction est impossible) → analyse de l’architecture totale (os, os alvéolaire...) → arrêt sur image = vision exacte de la réalité.<o:p></o:p>

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- Pour l’architecture, il faut faire une étude histologique, or le frottis est une étude cytologique.<o:p></o:p>

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V) Les progéniteurs<o:p></o:p>

- Progéniteurs hématopoïétiques : in vivo = CFU-S // in vitro = CFU-GM.<o:p></o:p>

- CFU-S : CS capables de proliférer dans la rate en donnant toutes les lignées sanguines.<o:p></o:p>

                  → Tout le monde dérive de la CSM !!<o:p></o:p>

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VI) Hématopoïèse<o:p></o:p>

- Processus permanant de fabrication de cellules sanguines pour maintenir les valeurs constantes.<o:p></o:p>

- Dans l’os spongieux, entre les travées osseuses dans les logettes ou espaces médullaires intra-trabéculaires.<o:p></o:p>

                  → On trouve de l’os dans le tissu alvéolaire, sauf en cas d’ostéoporose !<o:p></o:p>

- Quantité d’os et ratio volume d’os/volume de tissu doivent être maintenus constants.<o:p></o:p>

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- Sur les cellules bordantes → CSM, qui peuvent donner du tissu sanguin via les signaux d’appel → 3 possibilités :<o:p></o:p>

Ø  Les CS se décrochent et remontent le gradient du système d’alerte (du - vers le + concentré).<o:p></o:p>

Ø  Les CS se décrochent et deviennent des CS hématopoïétiques.<o:p></o:p>

Ø  La CS passe sous les ȼ bordantes et donne des cellules progénitrices osseuses.<o:p></o:p>

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- Barrière avec les ȼ bordantes : hématopoïèse à l’extérieur et tissu osseux à l’intérieur.<o:p></o:p>

- Ratio entre nb de ȼ osseuses et nb de ȼ hématopoïétiques à respecter.<o:p></o:p>

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VII) Les hématies<o:p></o:p>

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                  A) Erythropoïèse (dure 6 jours)<o:p></o:p>

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- CFU-GM = progéniteur le plus haut qu’on est capable d’identifier en culture (CFU-S si on est in vivo).<o:p></o:p>

Ø  Donne CFU-E (erythroblaste) en culture, immatures donc identiques entre elles, et BFU-E → progéniteurs.<o:p></o:p>

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- Précurseurs : pro-érythroblastes érythroblastes basophiles (cytoplasme bleu riche en REG, fabrique l’hème et la globine) → association hème + globine = hémoglobine érythroblastes acidophiles (cytoplasme rouge à cause de l’hémoglobine + disparition progressive des organites), reconnaissables sur un frottis sanguin.<o:p></o:p>

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- Erythroblaste acidophile chasse le noyau → réticulocyte (99% d’hémoglobine, qlq ribosomes et organelles).<o:p></o:p>

- Stade de maturation terminale : disparition des ribosomes hématies.<o:p></o:p>

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- Certaines hormones stimulent la prolifération des précurseurs : EPO (sécrétée par les tubes rénaux selon la teneur en O2 du sang grâce à la Vit B12 et à l’acide folique) + androgènes.<o:p></o:p>

- La taille diminue progressivement : 20 microns (pro-érythroblaste) 7,5 microns (GR).<o:p></o:p>

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            B) Les réticulocytes (1% des GR)<o:p></o:p>

- Forme intermédiaire entre le GR et le précurseur.<o:p></o:p>

- On peut les compter : coloration au bleu de crésyl qui colore les ribosomes (≠ hématies → pas de ribosomes !!).<o:p></o:p>

            → On peut ainsi savoir si la moelle est fonctionnelle par rapport à une baisse du taux d’hémoglobine :<o:p></o:p>

Ø  Baisse ou non des GR + réticulocytes élevés retour vers une homéostasie équilibrée.<o:p></o:p>

Ø  Réticulocytes normaux processus anémique non régénératif.<o:p></o:p>

Ø  Réticulocytes élevés + érythropoïèse efficace mais baisse des GR perte de GR en périphérie.<o:p></o:p>

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- En mesurant le taux d’hémoglobine, les réticulocytes et les GR, on peut déduire s’il y a un problème d’origine :   → Centrale (pas de régénération).<o:p></o:p>

                  → Périphérique (élimination anormale des GR par une hémorragie ou des anticorps).<o:p></o:p>

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            C) Biconcavité<o:p></o:p>

- Permet d’augmenter les surfaces d’échange : la totalité de la surface du GR sera en contact avec celle du capillaire.<o:p></o:p>

- Si les GR étaient parfaitement sphériques, leur surface d’échange serait diminuée de 30%.<o:p></o:p>

- La déformabilité du GR est due à son cytosquelette développé et diminue avec l’âge.<o:p></o:p>

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            D) Durée de vie et destruction<o:p></o:p>

- Les hématies ont une durée de vie moyenne de 120 jours.<o:p></o:p>

- Le GR possède une réserve d’ATP mais ne peut pas en reformer (pas de noyau) → la membrane va progressivement manquer d’énergie pour son cytosquelette → élimination par les monocytes macrophages.<o:p></o:p>

- La synthèse d’hématies est d’environ 200 milliards par jour<o:p></o:p>

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- Les GR sont détruits à 3 endroits :<o:p></o:p>

Ø  Au niveau de la rate (1er lieu d’élimination).<o:p></o:p>

Ø  Au niveau de la moelle osseuse.<o:p></o:p>

Ø  Au niveau du foie, dans les capillaires sinusoïdes.<o:p></o:p>

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VIII) Les plaquettes<o:p></o:p>

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            A) Thrombopoïèse = fabrication des plaquettes<o:p></o:p>

CSM CFU-S/GM CFU-Meg Mégacaryoblaste Mégacaryocyte basophile, puis granuleux plaquettes<o:p></o:p>

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- On a un seul mégacaryoblaste car la cellule se divise à l’intérieur d’elle-même (processus d’endomitose).<o:p></o:p>

- Mégacaryoblaste et mégacaryocyte sont multi-nucléées très grosses cellules (jusqu’à 150 microns).<o:p></o:p>

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- Par définition, les plaquettes (2 à 5 microns) ne sont pas des cellules fragments de cytoplasme, isolés ou regroupés → /!\ ne pas prendre un groupe de plaquettes pour 1 plaquette sur un frottis.<o:p></o:p>

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            B) Observation microscopique<o:p></o:p>

- Plaquette : pas de noyau / cytosquelette riche en actine et myosine / multitude de grains / mitochondries / cytoplasme granulaire / durée de vie 8-10 jours avant capture dans la rate / corps clairs (sco) ou foncés (std) :<o:p></o:p>

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Ø  Système tubulaire dense (std) : formé de tubules courts et aplatis dont le contenu est dense aux électrons, dérive du réticulum endoplasmique (= RE) de la cellule qui a donné naissance à la plaquette.<o:p></o:p>

Ø  Système canaliculaire ouvert (sco) : permet l’expulsion de grains au moment de l’activation plaquettaire de l’intérieur vers l’extérieur de la plaquette → échanges avec le milieu environnant.<o:p></o:p>

 

- Grains alpha : les plus nombreux, renferment les activateurs de l’hémostase.<o:p></o:p>

- Autres grains : renferment du calcium, de l’ATP et de la sérotonine.<o:p></o:p>

- On a donc un système de stockage (les granules) et un système d’expulsion qui permet de faire migrer les granules à la surface (sco).<o:p></o:p>

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            C) Activité des plaquettes<o:p></o:p>

- Forme de repos/non activée : discoïde = discocyte.<o:p></o:p>

- Forme activée : les plaquettes émettent des prolongements cytoplasmiques (= pseudopodes) → échynocyte.<o:p></o:p>

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- Cytosquelette riche en actine/myosine, cytoplasme granulaire, durée de vie de 8-10 jours dans le sang, destruction dans la rate.<o:p></o:p>

- 2 principaux facteurs de croissance cytokines VEGF (dévellopement de l’angioblaste) et PDGF (stimulation de précurseurs).<o:p></o:p>

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- Fonction : coagulation du sang au niveau des thrombus blanc ou clou plaquettaire → agrégats qui boucheront les orifices pour réduire la circulation = rôle dans l’inflammation.<o:p></o:p>

/!\ Si les plaquettes s’agrègent sur des plaques d’athéromes diamètre du vaisseau diminue<o:p></o:p>

débit sanguin diminue oxygène diminue = hypoxie ischémie peut conduire à la mort des tissus /!\<o:p></o:p>

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            D) Formation du thrombus<o:p></o:p>

Adhésion<o:p></o:p>

Ø  La plaquette possède beaucoup de récepteurs à sa surface (collagène, ADP, thrombine...) dont 2 importants         → Gp IB et GP IIB/IIIA.<o:p></o:p>

Ø  Production permanente par les ȼ endothéliales du facteur de von Willebrand → s’accroche sur du collagène.<o:p></o:p>

Ø  Le rc Gp IB de la plaquette est un rc pour le vWd la plaquette peut donc s’accrocher de 2 façons :<o:p></o:p>

v  Accrochage par son rc au collagène.<o:p></o:p>

v  Accrochage par Gp IB, accroché au facteur de vWd lui-même accroché au collagène.<o:p></o:p>

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Activation<o:p></o:p>

Ø  Les Gp IIB/IIIA sont intégrées aux autres Gp présentes à la surface de la plaquette, rc au fibrinogène.<o:p></o:p>

Ø  Libération de facteurs autour de la plaquette : F3P, F4P, sérotonine, ADP, calcium, thrombine...<o:p></o:p>

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Agrégation<o:p></o:p>

Ø  Soit la plaquette présente un Gp IB ou un rc au collagène : adhésion activation agrégation.<o:p></o:p>

Ø  Soit la plaquette est en suspension : activation adhésion à d’autres plaquettes agrégation.<o:p></o:p>

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IX) Les monocytes<o:p></o:p>

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            A) Ligné monocytaire<o:p></o:p>

CSM CFU-S CFU-GM Monoblaste Pro-monocytes Monocytes Macrophages (une fois dans les tissus)<o:p></o:p>

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            B) Monocytes<o:p></o:p>

- Quittent en permanence le sang pour aller dans les tissus (rôle de surveillance) et s’y installent longtemps.<o:p></o:p>

            → alertent les PNN et monocytes circulants en cas d’anomalie  le pool marginal est recruté.<o:p></o:p>

- Grandes cellules (20 microns) avec des voiles cytoplasmiques importants, rôle dans la phagocytose.<o:p></o:p>

- Noyau de forme très variable, cytoplasme présentant de petites granulations (visibles en ME) stress oxydatif.<o:p></o:p>

- Durée de vie : 1 à 2 jours dans le sang.<o:p></o:p>

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            C) Macrophages<o:p></o:p>

- Différenciation terminale du monocyte dans les tissus allant jusqu’à 50 microns.<o:p></o:p>

- Granulations de plus en plus importantes → fonctionnalité intense de la cellule, vacuoles de phagocytose.<o:p></o:p>

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- Les monocytes-macrophages sont doués de plusieurs fonctions :<o:p></o:p>

Ø  Phagocytose, puis présentation des Ag phagocytés aux L → induction de la réponse immunitaire.<o:p></o:p>

Ø  Chimiotactisme → attirance par certaines substances.<o:p></o:p>

Ø  Production de cytokines et radicaux libres (éléments toxiques).<o:p></o:p>

 

X) Polynucléaires neutrophiles<o:p></o:p>

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            A) Origine commune à tous les PN<o:p></o:p>

CSM CFU-S CFU-GM Myéloblastes Pro-myélocytes Myélocytes Métamyélocytes PN-N/B/E<o:p></o:p>

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            B) Structure<o:p></o:p>

- Apparitions des granulations primaires au stade de pro-myélocyte, et secondaires au stade myélocyte.<o:p></o:p>

- Myéloblaste = noyau rond → Neutrophile = noyau en trèfle à quatre feuilles.<o:p></o:p>

- Durée de vie de 24-48h → renouvellement très important effectué par la moelle osseuse.<o:p></o:p>

- Dans un PNN, on retrouve 3 condensations reliées par des ponts de chromatine, des granulations et des vacuoles.<o:p></o:p>

- Les PNN se déplacent vite et sont attirés par tout ce qui est étranger (sécrétion de facteurs attractifs).<o:p></o:p>

- Phagocytose très importante (fonction unique) et les PNN sont peu évolués → coûtent peu d’énergie.<o:p></o:p>

- 2 pools :<o:p></o:p>

                  → pool circulant : PN qui ne s’accrochent pas, circulent vite.<o:p></o:p>

                  → pool marginal : PN qui s’accrochent et se décrochent, finissent pas rester totalement accrochés.<o:p></o:p>

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            C) Granulations<o:p></o:p>

- Primaires (voie O2 indépendante) : azurophiles, contiennent myélopéroxydase + agents de la bactéricidie non oxydative.<o:p></o:p>

- Secondaires = lysosomes (voie O2 dépendante) : forme allongée en ME, renferment des molécules qui seront exocytées : lactoferrine, lysozyme (/!\ voie O2 indépendante /!\), phosphatase alcaline et cytochrome.<o:p></o:p>

- Dès que le PNN phagocyte, il crée une vacuole qui ira fusionner avec un lysosome → phago-lysosome, dont le contenu sera détruit par le lysosome = stress oxydatif.<o:p></o:p>

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            D) Stress oxydatif<o:p></o:p>

- Consomme beaucoup d’O2mort fréquente du PNN à la fin = pus lors d’une réponse inflammatoire.<o:p></o:p>

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- Lysozyme : enzyme qui détruit la paroi des bactéries Gram+<o:p></o:p>

- Lactoferrine : inhibe la multiplication des bactéries.<o:p></o:p>

- Lysosomes : provoquent la libération d’ions superoxydes (fortement bactéricide) à partir des molécules d’O2.<o:p></o:p>

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- Tout d’abord, le PNN utilise la NADPH pour transformer l’O2 en oxygène radicalaire (= anion superoxyde), puis la SOD (superoxyde dismutase) le transforme en hydrogène peroxyde = eau oxygénée.<o:p></o:p>

                  → Pour supprimer cette eau oxygénée, les PNN utilisent 3 enzymes :<o:p></o:p>

Ø  Catalase : eau oxygénée → 2 H2O + hydrogène<o:p></o:p>

Ø  Peroxydase : eau oxygénée → 2 H2O<o:p></o:p>

Ø  Myélopéroxydase : reproduit un radical hydrophile et un anion superoxyde<o:p></o:p>

- En s’amplifiant, la myélopéroxydase fragilise les tissus voisins → une réponse inflammatoire qui s’installe devient alors autodestructrice.<o:p></o:p>

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- Radicaux libres : morceaux de molécules oxygénées ayant perdu un électron (= instables), pouvant oxyder de nombreuses molécules biologiques → modifications irréversibles au niveau des principaux constituants de la cellule. Ex : les radicaux libres peuvent casser le cytosquelette d’un GR → plus de déformation.<o:p></o:p>

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            E) Voies de défense du PNN<o:p></o:p>

- Certains métabolismes mitochondriaux peuvent produire des radicaux libres.<o:p></o:p>

- Les GB, rayonnements UV, RI et tabac peuvent altérer l’ADN.<o:p></o:p>

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- Le PNN utilise alors 2 voies pour se défendre :<o:p></o:p>

Ø  Voie O2 indépendant : production d’acidose (empêche la prolifération bactérienne), de lysozyme ou de protéines cationiques.<o:p></o:p>

Ø  Voie O2 dépendant : phagocytose → phago-lysosome → libération d’ions superoxydes → stress oxydatif, que l’on peut stopper à l’aide de 2 enzymes (SOD et péroxydase/catalase).<o:p></o:p>

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XI) PN éosinophiles<o:p></o:p>

- Ce sont les PN les moins nombreux (1 à 5% des PN circulants).<o:p></o:p>

- Restent plusieurs jours dans la moelle osseuse mais 3 à 8h dans le sang.<o:p></o:p>

- Passent principalement dans la peau, les muqueuses digestives et pulmonaires où ils peuvent rester 10 jours.<o:p></o:p>

- Une de leur fonction est la défense contre les parasites.<o:p></o:p>

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- Légèrement plus gros que les PNN (15 microns), noyau bi-lobé, granulations spécifiques (rouge à la coloration au MGG) qui contiennent une structure cristalloïde → protéine basique majeure, visible en ME.<o:p></o:p>

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XII) PN basophiles<o:p></o:p>

- Moins de 1% sauf si allergie (10%)<o:p></o:p>

- Gros noyau (pouvant présenter plusieurs lobes), peu visible à cause des grosses granulations basophiles.<o:p></o:p>

- Dans ces granulations on retrouve de l’histamine et de l’héparine mais pas d’enzymes lysosomiales.<o:p></o:p>

Ø  Histamine : rougeurs par vasodilatation lors de réactions allergiques et augmentation de la perméabilité vasculaire.<o:p></o:p>

Ø  Héparine : glycosaminoglycane anticoagulante.<o:p></o:p>

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XIII) Lymphocytes<o:p></o:p>

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            A) Lymphocytes T et NK<o:p></o:p>

- Les LT naissent à partir d’un progéniteur qui arrive dans le thymus et la moelle osseuse, représentent 80% des cellules du sang et se divisent en 2 populations : LT CD4+ et LT CD8+.<o:p></o:p>

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- LT CD4+ (2 populations) :<o:p></o:p>

                  Représente 2/3 des LT<o:p></o:p>

Ø  Inducteurs auxiliaires → induisent la formation des CD8+<o:p></o:p>

Ø  Helpers → stimulent la prolifération et la synthèse d’AC au niveau des LB<o:p></o:p>

- LT CD8+ (2 populations) :<o:p></o:p>

                  Représente 1/3 des LT<o:p></o:p>

Ø  Suppresseurs → freinent des fonctions immunitaires<o:p></o:p>

Ø  Cytotoxiques → peuvent détruire certaines cellules (comme les NK)<o:p></o:p>

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- L NK : ne portent pas de marqueurs T à leur surface → pas de rc à l’Ag.<o:p></o:p>

- On ne peut pas différencier les L en cytologie classique, il faut utiliser des Ac qui les reconnaissent spécifiquement.<o:p></o:p>

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            B) Lymphocytes B<o:p></o:p>

- 5 à 10% des L du sang circulant, les L circulant ne représentant que 5% des L de l’organisme.<o:p></o:p>

- On en retrouve 30-40% dans les ggl lymphatiques, la rate, moelle osseuse et toutes les muqueuses digestives.<o:p></o:p>

- Noyau unique entouré par une bordure de cytoplasme.<o:p></o:p>

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            C) Plasmocytes (LB  différenciés)<o:p></o:p>

- Noyau ovalaire et excentré, où on trouve de la chromatine «en rayon de roue», spécifique de ce noyau.<o:p></o:p>

- Zone claire au contact du noyau → arcoplasme = appareil de Golgi.<o:p></o:p>

- Cytoplasme basophile avec beaucoup de REG → synthèse protéique ++.<o:p></o:p>

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- Usine de production d’Ac et d’Ig → on ne trouve pas de plasmocytes dans le sang circulant (sinon pathologie).<o:p></o:p>

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